2020-08-17 15:52
为了进一步弄清白花九里明提取物中的有效成分及其含量,作者采用高效液相色谱法和酶标法对提取物中的原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸、总黄酮、总有机酸的含量进行测定。
1药材、试剂与仪器
e2695型高效液相色谱仪;SQP型电子天平,赛多利斯科学仪器(北京)有限公司;miLLi-Q型超纯水系统,美国miLLipore;P300H型中型超声波清洗机,
2.对照溶液的制备
分别精密称取原儿茶酸、绿原酸和咖啡酸对照品适量,配成3种有机酸质量浓度分别为0.174 mg·mL-1、0.200mg·mL-1、0.071mg·mL-1的混合对照溶液,供HPLC分析使用;精密称取槲皮素对照品适量,配成0.0824mg·mL-1槲皮素对照溶液,供酶标分析使用;用赛多利斯电子天平精密称取原儿茶酸对照品适量,配成0.216mg·mL-1原儿茶酸对照溶液,供酶标分析使用。
3.供试溶液的制备
用赛多利斯电子天平精密称取白花九里明提取物约0.5g,置于10mL棕色容量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,超声10min后于3000r·min-1离心15min,取上清液,用0.45μm 微孔滤膜过滤,即得供试溶液,供HPLC分析使用。用赛多利斯电子天平精密称取白花九里明提取物70mg,置于100mL容量瓶中,加入1%三氯化铝溶液4mL,用70%甲醇定容,供酶标法测总黄酮使用。精密称取白花九里明提取物70mg,置于100mL容量瓶中,加入50%甲醇60mL、0.3%SDS溶液20mL、1%铁氰化钾-三氯化铁溶液10mL,用0.1moL·L-1HCL溶液定容,供酶标法测总有机酸使用。
4 结论
建立了白花九里明提取物中原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸、总黄酮和总有机酸含量的测定方法。方法简便、准确、重复性好,可作为白花九里明提取物中原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸、总黄酮和总有机酸的含量测定方法。