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电子天平在枸杞子中甜菜碱含量测定中的研究

导读:枸杞子为茄科植物宁夏枸杞的干燥成熟果实,是我国传统中药材,具有治疗糖尿病、保护视网膜、抗氧化等作用。甜菜碱是枸杞果实、叶、柄中主要的生物碱类成分,在人体内起甲基供


返回列表 来源:未知 发布日期:2020-07-30 14:11【
枸杞子为茄科植物宁夏枸杞的干燥成熟果实,是我国传统中药材,具有治疗糖尿病、保护视网膜、抗氧化等作用。甜菜碱是枸杞果实、叶、柄中主要的生物碱类成分,在人体内起甲基供体的作用,具有促进脂肪代谢、调节渗透压、抗应激等功效,被认为是枸杞子的主要活性物质之一。赛多利斯科学仪器(北京)有限公司了解到本研究建立了测定枸杞子中甜菜碱含量的HPLC法;并以甜菜碱含量为指标,采用单因素试验和正交试验对其提取方法进行了筛选;同时,将所建HPLC法与《中国药典》方法进行了比较,旨在为枸杞子的质量控制和甜菜碱的提取提供方法支持。

1仪器
1260型HPLC仪(美国Agilent公司);XS205DU型电子天平[
赛多利斯科学仪器(北京)有限公司];CQ-200B-DST型超声波清洗器(上海跃进医用光学器械厂);800Y型粉碎机(永康市铂欧五金制品有限公司)。

2供试品溶液制备
取枸杞子样品,于50℃烘干后,冷冻,粉碎,过二号筛,精密称取粉末1.0g,按一定方法提取后,用0.45μm
天津津腾微孔滤膜滤过,取续滤液作为供试品溶液。

3甜菜碱提取方法筛选
3.1单因素试验

(1)提取方法:用赛多利斯电子天平精密称取干燥后的枸杞子样品(批号:NKY01)6份,每份1.0g,分别置于具塞锥形瓶中,精密加入甲醇30mL,称定质量。取3份超声(功率:250W,频率:33kHz,下同)提取60min,另外3份加热回流提取60min,均冷却至室温,再次称定质量,用甲醇补足减失的质量,摇匀,用0.45μm津腾微孔滤膜滤过,取续滤液,按色谱条件进样测定,记录峰面积并按外标法计算甜菜碱含量。结果,超声提取和加热回流提取的提取液中甜菜碱的平均含量分别为2.20%和2.19%(n=3),两种方法所得甜菜碱的含量相似。故综合考虑实际操作和人为影响,最终选择超声提取作为枸杞子中甜菜碱的提取方法。

(2)提取溶剂:用赛多利斯电子天平精密称取干燥后的枸杞子样品(批号:NKY01)7份,每份1.0g,分别置于具塞锥形瓶中,精密加入甲醇、80%甲醇、70%甲醇、60%甲醇、50%甲醇、水和0.1mol/L盐酸溶液各30mL,称定质量,超声处理40min,冷却至室温,再次称定质量,用相应提取溶剂补足减失的质量,摇匀,用0.45μm津腾微孔滤膜滤过,取续滤液,按色谱条件进样测定,记录峰面积并按外标法计算甜菜碱含量。结果,上述溶剂提取液中甜菜碱的含量分别为2.21%、2.10%、1.95%、1.82%、1.80%、1.51%、1.43%,其中含量较高的溶剂依次为甲醇、80%甲醇、70%甲醇。

(3)提取时间:用赛多利斯电子天平精密称取干燥后的枸杞子样品(批号:NKY01)8份,每份1.0g,分别置于具塞锥形瓶中,精密加入甲醇30mL,称定质量,分别超声提取20、25、30、35、40、45、50、55min,冷却至室温,再次称定质量,用甲醇补足减失的质量,摇匀,用0.45μm津腾微孔滤膜滤过,取续滤液,按色谱条件进样测定,记录峰面积并按外标法计算甜菜碱含量。结果,上述提取时间提取液中甜菜碱的含量分别为1.68%、1.85%、2.02%、2.10%、2.13%、2.20%、2.21%、2.19%。可见,当提取时间超过45min后,甜菜碱含量的变化不大。

4讨论
综上所述,本研究建立了甜菜碱含量测定的HPLC法,并通过单因素试验和正交试验筛选了枸杞子中甜菜碱的最佳提取方法,通过比较本研究所建HPLC法测定结果与《中国药典》薄层色谱法测定结果的差异,发现几乎无明显差异。由此表明,本研究成功建立了枸杞子中甜菜碱的定量分析方法和提取方法,可为枸杞子中甜菜碱的含量测定提供方法支持。


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